Co to jest mikroskop konfokalny?

Mikroskop konfokalny jest szczególnym rodzajem mikroskopu fluorescencyjnego stosowanego do uzyskania wysokiej jakości obrazów 2D i 3D.Z podstawowym (szerokim pola) mikroskopem fluorescencyjnym światło o określonej długości fali lśni na próbce, a próbka pochłania część tego światła i odbija resztę na dłuższej długości fali.Dłuższe światło długości fali przechodzi przez lustro dichroiczne, które umożliwia przechodzenie przez dłuższe światło długości fali, ale nie oryginalne (krótsze) światło długości fali.Osoba oglądająca próbkę widzi tylko światło, które przeszło przez lustro dichroiczne.Podstawowe mikroskopy fluorescencyjne wychwytują zarówno światło w wyniku skupienia, jak i poza skupieniem, które działa dobrze w przypadku dużych próbek, w których nie jest wymagana bardzo wysoka rozdzielczość.Nie działa tak dobrze w przypadku przeglądania drobnych szczegółów.Potrzebny jest konfokalny mikroskop do przechwytywania obrazów fluorescencyjnych o wysokiej rozdzielczości.

Mikroskop konfokalny wykorzystuje otwór do odrzucenia światła ostrości.Zamiast światła przechodzącego tylko przez lustro dichroiczne, światło przepuszczają zarówno lustro dichroiczne, jak i otwór, co oznacza, że osoba oglądająca próbkę widzi tylko jeden punkt próbki.Aby wyświetlić całą próbkę, ruchome lustra skanują światło na prostokątnej płaszczyźnie próbki, a komputer zbiera emitowane światło w miarę skanowania próbki.Pełny skan spowoduje plasterek optyczny lub przekrój próbki.Ten typ mikroskopii nazywa się konfokalną mikroskopią skanującą laserową, częściowo dlatego, że laser jest używany jako źródło światła.

Aby utworzyć obraz 3D, wykonano kilka skanów, tworząc kilka plasterków próbki, a komputer łączy każdy plasterekUtwórz trójwymiarowy obraz.Mikroskop można zaprogramować, aby zmieniać przestrzeń między plasterkami, w zależności od tego, jak wyraźny obraz 3D chce uzyskać.Mikroskop może również zmieniać prędkość, z jaką skanuje obraz, z powolnym skanowaniem, co daje wyższą rozdzielczość niż szybkie skanowanie.

Mikroskop konfokalny stał się bardzo powszechnie używanym sprzętem w wielu laboratoriach nauk życiowych.Są drogie i nieco duże i często mają pokoje poświęcone ich użyciu, ponieważ pokój musi być ciemny, aby uzyskać dobry obraz fluorescencyjny.Chociaż mikroskopy konfokalne są najczęściej stosowane do oglądania komórek i struktur w komórkach, można je wykorzystać do uzyskania obrazu dowolnej trójwymiarowej próbki fluorescencyjnej i czasami są używane do oglądania materiałów półprzewodników.